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液相色譜法（hplc）已成為有機(jī)化學(xué)分析的重要手段之一。同樣，hplc已經(jīng)成為食品分析中*的分析工具，無論是殘留分析還是成分分析。和其他分析儀器一樣，如果你希望hplc為你工作并獲得可靠的數(shù)據(jù)，你首先必須維護(hù)它并使它處于良好的待機(jī)狀態(tài)。這樣，當(dāng)你為分析而操縱它時(shí)，你就能相對順利地得到預(yù)期的結(jié)果。良好的標(biāo)準(zhǔn)操作習(xí)慣可以延長儀器的使用壽命。當(dāng)你在學(xué)?；蚪邮軜菲鞴镜挠?xùn)練時(shí)，老師或工程師會提出許多操作上的預(yù)防措施。但總而言之，重要的是三件事：除氣、過濾和沖洗。本文對這三點(diǎn)進(jìn)行了探討，并對從事hplc分析的新員工提出了一些建議，以期有助于正確操作儀器。歡迎有經(jīng)驗(yàn)的專家與我們分享他們的經(jīng)驗(yàn)并提出好的建議。

一、脫氣

流動(dòng)相脫氣是避免HPLC系統(tǒng)問題，順利獲得理想數(shù)據(jù)的一種非常有效的方法。在HPLC系統(tǒng)中不需要?dú)馀?。液相色譜(HPLC)泵在輸送液體時(shí)會產(chǎn)生很大的作用力。因?yàn)闅怏w的壓縮比液體的大得多，當(dāng)氣泡存在時(shí)，你會觀察到流量和系統(tǒng)壓力的瞬時(shí)下降。如果氣泡足夠大，液泵將無法輸送任何溶劑，如果壓力低于預(yù)設(shè)的壓力限制，泵將停止工作。有些泵被設(shè)計(jì)用來很好地消除氣泡，而另一些泵被設(shè)計(jì)成在氣泡存在時(shí)停止運(yùn)轉(zhuǎn)。

當(dāng)氣泡通過輸液泵時(shí)，由于系統(tǒng)的高壓，氣泡通常在流動(dòng)相溶液中流動(dòng)，并與流動(dòng)相通過柱。然而，當(dāng)系統(tǒng)壓力回到大氣壓力時(shí)，當(dāng)系統(tǒng)壓力到達(dá)探測器的流動(dòng)單元時(shí)，氣泡可能會再次出現(xiàn)在探測器的流動(dòng)單元中，并且會出現(xiàn)不規(guī)則的氣泡。為了解決這一問題，一些儀器公司設(shè)計(jì)了一種反壓力控制器，在探測器出口處提供足夠的壓力，使氣泡在流動(dòng)相中溶解，直到氣泡從檢測器中流出為止。當(dāng)然，這種壓力不能超過循環(huán)池所能承受的壓力極限，否則探測器可能會損壞。

紫外/可見（UV / VIS）檢測器的液相色譜圖中的噪聲干擾通常表示氣泡進(jìn)入并通過流動(dòng)池。一些探測器對空氣的存在也非常敏感，但表現(xiàn)出與UV / VIS不同的跡象。例如，據(jù)報(bào)道，當(dāng)使用熒光（FL）檢測器時(shí)，流動(dòng)相中溶解氧的存在可能導(dǎo)致一些化合物丟失。熒光。此外，電化學(xué)（EC）檢測器檢測由待測物質(zhì)在電極表面上的氧化還原反應(yīng)引起的電流變化，對流動(dòng)相中溶解氧的存在也非常敏感。另外，氣泡的存在有時(shí)會導(dǎo)致不能再現(xiàn)保留時(shí)間。

因此，必須注意消除流動(dòng)相中的空氣，避免空氣通過管道（如聚四氟乙烯管）進(jìn)入流動(dòng)相。

如果在使用前適當(dāng)注意將溶解的空氣從流動(dòng)階段移除，這些問題可以避免或盡量減少影響。常用的除氣方法如下：

1.吹氦脫氣。利用氦在液體中的溶解度低于空氣的特點(diǎn)，在0.1 MPa壓力下，以約60mL/min的流速將溶解的空氣有效地從流動(dòng)相中去除到流動(dòng)相儲液容器中，持續(xù)15min，當(dāng)流速約為60min時(shí)，可有效地將溶解的空氣從流動(dòng)相中除去。可以帶走近80%的氧氣。通過一種的分布式噴射裝置，氦的體積可以從流動(dòng)相中去除到幾乎所有相同體積的氣體中。這意味著1L氦可以通過1L流動(dòng)相排出。雖然這種除氣方法很好，但在我國氦的價(jià)格較高，而且很少有實(shí)驗(yàn)室采用這種方法。

2.加熱法該方法效果較好。在運(yùn)行過程中要注意塔的冷卻效率，否則會損失溶劑，改變混合流動(dòng)相的比例。

3.真空脫氣方法。該方法可以通過使用真空泵除去溶解的氣體并將壓力降低至0.05至0.07MPa。然而，由于真空脫氣改變了混合溶劑的組成，這影響了實(shí)驗(yàn)的再現(xiàn)性，因此通常用于單一溶劑系統(tǒng)的簡單分析。

4.超聲波脫氣法。將要脫氣的流動(dòng)相置于超聲波清潔器中，并用超聲波沖擊10-20分鐘。該方法除氣效果差。

5.在線除氣方法?，F(xiàn)在，該產(chǎn)品的hplc儀器可以配備在線脫氣機(jī)。在線除氣操作簡單，失敗率低，效果好。建議購買儀器必須購買，有些公司作為購買的一部分，所以與儀器公司配置時(shí)應(yīng)與公司確認(rèn)。