爱上继子的母亲免费版电视剧,亚洲av乱码一区二区三区香蕉,日日摸夜夜添夜夜添亚洲女人,国产亚洲精久久久久久无码

　　液相色譜儀對于沒有用過它的人來說很遙遠(yuǎn)，所以大家對于它也談不上多么的了解所以我們準(zhǔn)備介紹一下液相色譜儀流動相的選用要求及工作原理，不知道的話大家可以一起來了解一下。

　　液相色譜(highperformanceliquidchromatography,HPLC)也叫高壓液相色譜(highpressureliquidchromatography)、高速液相色譜(highspeedliquidchromatography)、高分離度液相色譜(highresolutionliquidchromatography)等。是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相，故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。

　　液相色譜儀流動相的選用要求包括流動相性質(zhì)要求、流動相選擇、流動相pH值、流動相脫氣、流動相過濾、流動相貯存、鹵代溶劑應(yīng)特別注意的問題和HPLC用水等方面。

　　一、液相色譜儀流動相性質(zhì)要求：

　　HPLC中，強(qiáng)溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少，相應(yīng)的容量因子k值減小;較弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附增加，相應(yīng)的容量因子k值增大。因此，k值是流動相組成的函數(shù)。理論塔板數(shù)一般與流動相的粘度成反比。

　　1、流動相應(yīng)不改變填料的任何性質(zhì)：

　　低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時(shí)遇到某些有機(jī)相會溶脹或收縮，從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。

　　堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。

　　酸性流動相不能用于氧化鋁和氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。

　　2、純度高：

　　色譜柱的壽命與大量流動相通過有關(guān)，特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時(shí)。

　　3、必須與檢測器匹配：

　　當(dāng)使用UVD時(shí)，所用流動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收或吸收很小。

　　當(dāng)使用RID時(shí)，應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動相，以提高靈敏度。

　　4、粘度低：

　　高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴(kuò)散和傳質(zhì)，使柱效降低，還會使柱壓增加，分離時(shí)間延長。選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動相。

　　5、對樣品的溶解度要適宜：

　　如果溶解度欠佳，樣品會在色譜柱內(nèi)沉淀，不但影響純化分離，而且會使色譜柱惡化。

　　6、樣品易于回收：

　　應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。

　　二、流動相選擇：

　　HPLC中，溶劑的洗脫能力與溶劑極性相關(guān)。

　　1、正相色譜的流動相：

　　在正相色譜中，溶劑強(qiáng)度隨極性的增強(qiáng)而增加。

　　正相色譜的流動相通常采用烷烴加適量極性調(diào)整劑。

　　2、反相色譜的流動相：

　　在反相色譜中，溶劑強(qiáng)度隨極性的增強(qiáng)而減弱。

　　反相色譜的流動相通常以水作基礎(chǔ)溶劑，再加入一定量的能與水互溶的極性調(diào)整劑(如甲醇、乙腈等)。極性調(diào)整劑的性質(zhì)及所占比例對溶質(zhì)的保留值和分離選擇性有顯著影響。一般情況下，甲醇-水系統(tǒng)滿足多數(shù)樣品的分離要求，且流動相粘度小，價(jià)格低，是反相色譜zui常用的流動相。

　　乙腈-水系統(tǒng)與甲醇-水系統(tǒng)相比，乙腈的溶劑強(qiáng)度較高且粘度較小，可滿足在紫外185～205nm處檢測的要求，綜合來看，乙腈-水系統(tǒng)優(yōu)于甲醇-水系統(tǒng)。

　　在分離含極性差別較大的多組分樣品時(shí)，為了使各組分均有合適的k值并分離良好，需采用梯度洗脫。

　　三、流動相pH值：

　　采用反相色譜分離弱酸(3≤pKa≤7)或弱堿(7≤pKa≤8)樣品時(shí)，通過調(diào)節(jié)流動相pH值，以抑制樣品組分的解離、增加組分在固定相上的保留和改善峰形的技術(shù)，稱為反相離子抑制。

　　1、弱酸樣品：

　　對于弱酸樣品，流動相pH值越小，組分k值越大，當(dāng)pH值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于弱酸pKa值時(shí)，弱酸主要以分子形式存在。

　　分離弱酸樣品時(shí)，通常在流動相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液。

　　2、弱堿樣品：

　　對于弱堿樣品，情況與弱酸樣品相反。

　　分離弱堿樣品時(shí)，通常在流動相中加入少量弱堿，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液。