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隨著現(xiàn)代化社會的不斷進步和需求，科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和提升，各種高產(chǎn)品及技術(shù)如春雨后竹筍般蓬勃發(fā)展。液相色譜產(chǎn)品及液相色譜技術(shù)就是為了適應(yīng)和滿足這種社會需要悄然而生，并逐漸成長發(fā)展直至壯大起來，正因如此大家可以一起來了解一下液相色譜儀使用技巧及工作原理。

液相色譜儀工作原理

系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對運動時，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來液相色譜儀主要有進樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。

液相色譜儀使用技巧

作為先進、精密的儀器，液相色譜儀是用于的科學(xué)研究，用于復(fù)雜的化學(xué)分析，用于關(guān)于民生問題的監(jiān)測、檢測等。儀器的正常運行，準確的結(jié)果數(shù)據(jù)是每個操作者所期待并向往的。那么儀器的正確使用和正確維護就顯得尤為重要。

液相色譜儀實驗前的準備工作

1.過濾流動相。為了保證流動相潔凈，流動相使用前都必須微膜過濾。

2.流動相脫氣。為了避免流動相中氣泡對儀器（氣泡可能會對儀器及相關(guān)設(shè)備的正常使用及壽命產(chǎn)生一定影響）及分析結(jié)果的影響。

3.運行液相泵前盡量先清洗泵柱塞部件。清洗液一般采用10%甲醇溶液，也有采用10%異丙醇溶液（5%甲醇或異丙醇等有機相溶液能避免微生物污染，但濃度不能太高，高于20%緩沖液可能會導(dǎo)致鹽結(jié)晶析出，碰到酸堿類物質(zhì)可能會有比較強烈的反應(yīng)；另外異丙醇粘度較大，清洗能力較強；也有采用純水清洗的，這樣如果儀器每天使用還行，如果長期不用，為了防止微生物繁殖，純水還得用含有有機相的清洗液置換出去）沖洗，這是為了保護泵柱塞和密封圈等部件在泵運行時不被結(jié)晶鹽等磨損而導(dǎo)致泵頭漏液。

4.每天運行儀器前先排氣。一般的液相色譜儀都有排氣功能，沒有的可以不接色譜柱開機運行幾分鐘排氣。

5.泵運行時盡量不采用大流量模式（主要是換流動相或排氣泡等，流量盡量設(shè)為3.0ml/min以內(nèi)，這樣更有利于保護泵柱塞桿和密封圈等部件的壽命）。

6.分析前先對色譜系統(tǒng)（整個流路）進行沖洗及平衡，尤其是色譜柱。先用純甲醇沖洗30分鐘，再換10%甲醇水溶液沖洗30分鐘，后換含緩沖鹽或酸堿類物質(zhì)的流動相平衡30分鐘。色譜柱如果長期沒用，每一步?jīng)_洗、平衡量盡量為色譜柱柱容量20倍以上）。如果流動相中不含緩沖鹽或酸堿類物質(zhì)，純甲醇沖洗完可直接換為流動相。使用色譜柱前知道或懷疑色譜柱中殘留有或酸堿鹽類物質(zhì)，在用純甲醇沖洗前增加一步10%甲醇水溶液沖洗。

7.如果色譜柱需要控溫（升溫），要先運行泵后再設(shè)柱溫箱溫度。

8.待儀器運行穩(wěn)定后（基線基本走平后，這個是經(jīng)驗值），方可進樣。

樣品前處理

1.樣品濃度不要太大，雜質(zhì)不要太多，否則色譜柱處理起來壓力很大。

2.進樣前樣品一定得先經(jīng)微膜（一般采用0.22um或0.45um微膜）過濾。

液相色譜儀實驗過程中注意事項

1.為了避免進樣器殘留影響，進樣前先對進樣器進行清洗（這個不是必須的，但好是每進一針樣品或標準品前都清洗進樣器和進樣針，當然同一樣品也可以不洗，不同樣品盡量洗），清洗順序為純水、甲醇、流動相。

2.每進一針樣品后要對系統(tǒng)進行一次沖洗、平衡后再進下一針樣品（等度要求不高，梯度要求相對高，主要是沖洗色譜柱中殘留的強保留物質(zhì)）。

液相色譜儀實驗完畢的后續(xù)工作

1.做完樣要先清洗進樣器，清洗順序為純水、甲醇。

2.關(guān)閉柱溫箱溫度設(shè)置。

3.沖洗色譜系統(tǒng)及色譜柱。先用10%甲醇水溶液沖洗30分鐘后換為純甲醇沖洗30分鐘，待基線基本走平停泵。如果流動相中不含緩沖鹽或酸堿類物質(zhì)，沖洗時流動相可直接換為純甲醇。色譜柱用完后如果長時間內(nèi)不會再用，純甲醇沖洗量要大于色譜柱柱容量20倍以上的，沖洗后卸下，兩端密封保存。

4.待色譜柱溫度降至接近于室溫時再停泵、關(guān)機（這一點需特別注意，目的是防止溫度過高損壞色譜柱）。

5.關(guān)機前用清洗液清洗柱塞桿。

儀器長時間不用的維護方法

1.如果長時間不做實驗要經(jīng)常開啟下儀器，好是半個月到一個月開啟一次。

2.儀器內(nèi)要充滿甲醇保護（或者用高純氮氣吹干液路中的液體后密封液路兩端）。

3.色譜柱好卸下，兩端密封保存，并堵上拆下色譜柱兩端的管路。

4.要保證實驗室清潔、干燥、通風(fēng)，無強光照射，無腐蝕性氣體，無強烈振動等。

儀器好具有分析結(jié)果準確，分析時間短，故障率低，使用壽命長等多種優(yōu)勢。正確使用和維護，儀器就會長期保持良好的狀態(tài)和性能，使用起來就會既順手又準確，所以對儀器的正確使用和正確維護的重要程度不言而喻，這個不用說大家都知道，那是重要加非常的。

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