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液相色譜柱使用的兩個(gè)方法

2011-01-04

   以下是關(guān)于液相色譜儀柱子方面的兩個(gè)使用哪個(gè)方法:

色譜柱在使用前,更好進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來(lái),作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測(cè)試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行出廠測(cè)試所使用的條件是更佳條件,只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。
1
、流動(dòng)相的配制:
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn):
a
、流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中或長(zhǎng)時(shí)間保留在柱中
b
、流動(dòng)相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)特殊情況除外。
c
、流動(dòng)相的黏度要盡量小,以便在使用較長(zhǎng)的分析柱時(shí)能得到好的分離效果;同時(shí)降低柱壓降,延長(zhǎng)液體泵的使用壽命可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度。
d
、流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測(cè)器相適應(yīng)。如使用UV檢測(cè)器,更好使用對(duì)紫外吸收較低的溶劑配制。
e
、流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行。
f
、在流動(dòng)相配制好后,一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測(cè),還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。

2、樣品的前處理:
a
、更好使用流動(dòng)相溶解樣品。
b
、使用予處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。
c
、使用0.45μm的過(guò)濾膜過(guò)濾除去微粒雜質(zhì)。

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